培養基的成分
1、用于植物組織培養的培養基迄今不下幾十種。歸納起來,任何一種培養基均有以下幾部分組成:無機鹽(大量元素、微量元素),有機化合物(蔗糖、維生素類、氨基酸、核酸及其他水解化合物),鐵鹽螯合劑,植物激素。
植物激素的純度對于組織培養的成功至關重要。接種的外植體,其分化速度(長芽)和分化方向(長根),均取決于所加激素的種類、數量及比例。簡言之,主要是生長素和細胞分裂素的加入量以及兩者的比例。一般生長素類包括吲哚乙酸、吲哚丁酸、萘乙酸;細胞分裂素類包括激動素、芐基氨基嘌呤、二甲基丙烯氨基嘌呤。
培養基中的糖類主要是蔗糖,少數情況下使用葡萄糖。大量生產可使用蔗糖。糖在培養基中的作用是提供碳源,同時用于維持滲透平衡,瓊脂是固體培養基中的成分,作為固化劑支持。培養物在培養基的成本消耗中,瓊脂占有相當大的比例,培養基中瓊脂的加入量一般為4-7g。
2、在組織培養生產中,培養基的制備對母液的需求量相當大,需一批一批地連續配制。為簡化配制過程,提高工作效率,一般將各種所需藥品先配制成高濃度溶液,貯備起來。到配制培養基時,按要求的濃度取一定量稀釋即可;我們稱這些高濃度的溶液為貯備液,習慣上稱母液。
制備母液時,先將所有藥品分成幾組,每組藥品制成一種母液。分組的原則是同組藥品混合溶解時不會發生質的變化,也不產生沉淀。一般將藥品分成5組:大量元素、微量元素、鐵鹽、有機化合物類和植物激素。其中植物激素母液有若干種,每種激素都先制成1mg/ml的溶液。